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聚合酶链反应(PCR)结果判定标准 题目预览

• 第 1 题 单选题
  PCR扩增无条带，可能由于（ ）。
  • A. 模板DNA浓度过低
  • B. 退火温度过低
  • C. 引物浓度过高
  • D. 扩增循环数过多
  解析：模板DNA浓度过低可能导致PCR扩增效率低，从而无可见条带；退火温度过低可能引起非特异性扩增；引物浓度过高可能导致引物二聚体；扩增循环数过多可能产生过多产物，但通常不会导致无条带。
• 第 2 题 单选题
  在PCR结果判定中，如果所有对照均正常而样品无条带，通常判定为（ ）。
  • A. 实验失败
  • B. 样品阴性
  • C. 需优化条件
  • D. 仪器故障
  解析：当阳性对照有条带、阴性对照无条带时，表明PCR反应体系工作正常，样品无条带说明目标序列不存在，因此判定为样品阴性。
• 第 3 题 单选题
  PCR扩增无条带时，不应首先考虑的原因是（ ）。
  • A. 模板DNA降解
  • B. 引物设计不当
  • C. 电泳电压过高
  • D. 酶失活
  解析：PCR扩增无条带主要与反应体系有关，如模板、引物、酶等；电泳电压过高是电泳条件问题，应在确认PCR反应正常后再考虑，因此不应首先考虑。
• 第 4 题 单选题
  PCR扩增无条带，若内参基因也无条带，则可能的原因是（ ）。
  • A. 模板DNA问题
  • B. PCR反应体系问题
  • C. 引物问题
  • D. 以上都是
  解析：内参基因无条带表明整个PCR反应可能失败，原因可能包括模板DNA问题、PCR反应体系问题或引物问题等，因此以上都是可能的原因。
• 第 5 题 判断题
  PCR扩增无条带一定意味着样品中目标序列不存在。
  • A. 对
  • B. 错
  解析：PCR扩增无条带可能由于模板DNA降解、反应条件不当等多种原因，不一定表示目标序列不存在。
• 第 6 题 判断题
  在PCR实验中，如果阳性对照有条带而样品无条带，可以判定样品为阴性。
  • A. 对
  • B. 错
  解析：阳性对照有条带表明PCR体系工作正常，样品无条带说明目标序列可能不存在，但需确保阴性对照无条带以避免污染。
• 第 7 题 多选题
  PCR扩增无条带可能的原因包括（ ）。
  • A. 模板DNA降解
  • B. 引物浓度过低
  • C. 退火温度过高
  • D. 酶失活
  • E. 电泳时间不足
  解析：模板DNA降解、引物浓度过低、退火温度过高、酶失活都是导致PCR扩增失败的常见原因；电泳时间不足可能影响条带显示，但并非直接导致扩增无条带。
• 第 8 题 多选题
  判定PCR扩增无条带样品为阴性时，需要满足的条件是（ ）。
  • A. 阳性对照有条带
  • B. 阴性对照无条带
  • C. 内参基因有条带
  • D. 样品重复实验无条带
  • E. 使用新鲜试剂
  解析：判定样品阴性需确保PCR反应有效（阳性对照有条带）、无污染（阴性对照无条带）、模板质量可靠（内参基因有条带）；重复实验和使用新鲜试剂是实验要求，但非判定阴性的必要条件。